ആർഎൻഎക്ലീൻ കിറ്റ്

എ -1 സെൽ ലൈസിസ് അല്ലെങ്കിൽ ഹോമോജെനൈസേഷൻ പര്യാപ്തമല്ല

---- സാമ്പിൾ ഉപയോഗം കുറയ്ക്കുക, ലിസിസ് ബഫറിന്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുക, ഏകീകൃതവും ലിസിസ് സമയവും വർദ്ധിപ്പിക്കുക.

A-2 സാമ്പിൾ തുക വളരെ വലുതാണ്

---- ഉപയോഗിച്ച സാമ്പിളിന്റെ അളവ് കുറയ്ക്കുക അല്ലെങ്കിൽ ലിസിസ് ബഫറിന്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുക.

A-1 അപര്യാപ്തമായ സെൽ ലൈസിസ് അല്ലെങ്കിൽ ഏകതാപനം

---- സാമ്പിൾ ഉപയോഗം കുറയ്ക്കുക, ലിസിസ് ബഫറിന്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുക, ഏകീകൃതവും ലിസിസ് സമയവും വർദ്ധിപ്പിക്കുക.

A-2 സാമ്പിൾ തുക വളരെ വലുതാണ്

---- പരമാവധി പ്രോസസ്സിംഗ് ശേഷി റഫർ ചെയ്യുക.

എ -3 ആർഎൻഎ കോളത്തിൽ നിന്ന് പൂർണമായി ഒഴിവാക്കിയിട്ടില്ല

---- RNase-free വെള്ളം ചേർത്തതിനുശേഷം, സെൻട്രിഫ്യൂജിംഗിന് മുമ്പ് കുറച്ച് മിനിറ്റ് വിടുക.

എ-എഥനോൾ എലുവന്റിൽ

---- കഴുകിയ ശേഷം വീണ്ടും സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്ത് വാഷിംഗ് ബഫർ കഴിയുന്നത്ര നീക്കം ചെയ്യുക.

എ -5 സെൽ കൾച്ചർ മീഡിയം പൂർണ്ണമായും നീക്കം ചെയ്തിട്ടില്ല

---- സെല്ലുകൾ ശേഖരിക്കുമ്പോൾ, കഴിയുന്നത്ര സംസ്കാര മാധ്യമം നീക്കംചെയ്യുന്നത് ഉറപ്പാക്കുക.

എ -6 ആർ‌എൻ‌എ സ്റ്റോറിൽ സംഭരിച്ചിരിക്കുന്ന സെല്ലുകൾ ഫലപ്രദമായി കേന്ദ്രീകൃതമല്ല

---- RNAstore സാന്ദ്രത ശരാശരി സെൽ കൾച്ചർ മീഡിയത്തേക്കാൾ കൂടുതലാണ്; അതിനാൽ അപകേന്ദ്രബലം വർദ്ധിപ്പിക്കണം. 3000x ഗ്രാം സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യാൻ നിർദ്ദേശിക്കുന്നു.

A-7 സാമ്പിളിൽ കുറഞ്ഞ RNA ഉള്ളടക്കവും സമൃദ്ധിയും

---- കുറഞ്ഞ വിളവ് സാമ്പിൾ മൂലമാണോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു പോസിറ്റീവ് സാമ്പിൾ ഉപയോഗിക്കുക.

A-1 മെറ്റീരിയൽ പുതിയതല്ല

---- ഫ്രഷ് ടിഷ്യൂകൾ ദ്രാവക നൈട്രജനിൽ ഉടനടി സംഭരിക്കേണ്ടതാണ് അല്ലെങ്കിൽ ഉടനടി ആർഎൻഎസ്റ്റോർ റിയാജന്റിൽ വെച്ചുകൊണ്ട് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ പ്രഭാവം ഉറപ്പാക്കണം.

A-2 സാമ്പിൾ തുക വളരെ വലുതാണ്

---- സാമ്പിൾ തുക കുറയ്ക്കുക.

A-3 RNase മലിനീകരണംn

---- കിറ്റിൽ നൽകിയിരിക്കുന്ന ബഫറിൽ RNase അടങ്ങിയിട്ടില്ലെങ്കിലും, വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ പ്രക്രിയയിൽ RNase മലിനീകരിക്കാൻ എളുപ്പമാണ്, അത് ശ്രദ്ധയോടെ കൈകാര്യം ചെയ്യണം.

എ -4 ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് മലിനീകരണം

---- ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫർ മാറ്റി ഉപഭോഗവസ്തുക്കളും ലോഡിംഗ് ബഫറും RNase മലിനീകരണമില്ലാത്തതാണെന്ന് ഉറപ്പാക്കുക.

എ -5 ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് വളരെയധികം ലോഡിംഗ്

---- സാമ്പിൾ ലോഡിംഗിന്റെ അളവ് കുറയ്ക്കുക, ഓരോ കിണറിന്റെയും ലോഡിംഗ് 2 μg കവിയാൻ പാടില്ല.

A-1 സാമ്പിൾ തുക വളരെ വലുതാണ്

---- സാമ്പിൾ തുക കുറയ്ക്കുക.

A-2 ചില സാമ്പിളുകളിൽ ഉയർന്ന ഡിഎൻഎ ഉള്ളടക്കം ഉണ്ട്, അവ ഡിഎൻഎസിലൂടെ ചികിത്സിക്കാം.

---- ലഭിച്ച ആർ‌എൻ‌എ ലായനിയിലേക്ക് ആർ‌എൻ‌എസ്-ഫ്രീ ഡി‌എൻ‌എസ് ചികിത്സ നടത്തുക, കൂടാതെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് ആർ‌എൻ‌എ നേരിട്ട് ഉപയോഗിക്കാം, അല്ലെങ്കിൽ ആർ‌എൻ‌എ ശുദ്ധീകരണ കിറ്റുകൾ വഴി കൂടുതൽ ശുദ്ധീകരിക്കാം.

ഗ്ലാസ്വെയറുകൾക്ക്, 150 ° C ൽ 4 മണിക്കൂർ ചുട്ടു. പ്ലാസ്റ്റിക് കണ്ടെയ്നറുകൾക്ക്, 0.5 M NaOH- ൽ 10 മിനിറ്റ് മുക്കിവയ്ക്കുക, തുടർന്ന് RNase- ഇല്ലാത്ത വെള്ളത്തിൽ നന്നായി കഴുകുക, തുടർന്ന് RNase പൂർണ്ണമായും നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനായി അണുവിമുക്തമാക്കുക. പരീക്ഷണത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന രാസവസ്തുക്കൾ അല്ലെങ്കിൽ പരിഹാരങ്ങൾ, പ്രത്യേകിച്ച് വെള്ളം, RNase- ൽ നിന്ന് സ്വതന്ത്രമായിരിക്കണം. എല്ലാ റിയാജന്റ് തയ്യാറെടുപ്പുകൾക്കും RNase-free വെള്ളം ഉപയോഗിക്കുക (ശുദ്ധമായ ഒരു ഗ്ലാസ് കുപ്പിയിൽ വെള്ളം ചേർക്കുക, 0.1% (V/V) അവസാന സാന്ദ്രതയിലേക്ക് DEPC ചേർക്കുക, ഒറ്റരാത്രി കുലുക്കി ഓട്ടോക്ലേവ് ചെയ്യുക).