GMO ക്രോപ്പ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ & ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കിറ്റ്
സവിശേഷതകൾ
Applic വിശാലമായ പ്രയോഗക്ഷമത: ഈ കിറ്റിന് അഞ്ച് പ്രധാന GMO വിളകളിൽ നിന്ന് ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ള ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കാൻ കഴിയും.
And ലളിതവും വേഗമേറിയതും: GMO വിള ജനിതക ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ 2 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ പൂർത്തിയാക്കാൻ കഴിയും. വലിയ റഫ്രിജറേറ്റഡ് സെൻട്രിഫ്യൂജുകളുടെ ആവശ്യമില്ല, ഉപകരണങ്ങളുടെയും ഉപകരണങ്ങളുടെയും കുറഞ്ഞ ആവശ്യകതകൾ. ഗവേഷണ സ്ഥാപനങ്ങളുടെ എല്ലാ തലങ്ങളിലും GMO വിളകളുടെ ദ്രുതഗതിയിലുള്ള ജനിതക ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കാൻ അനുയോജ്യം.
Efficiency ഉയർന്ന കാര്യക്ഷമതയും പ്രത്യേകതയും: ആന്റിബോഡി-മോഡിഫൈഡ് ടാക് പോളിമറേസിന്റെ തനതായ ബഫർ കാര്യക്ഷമമായ പോളിമറേസ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉറപ്പാക്കുന്നു, ഇത് സാധാരണ ടാക് പോളിമറേസിനേക്കാൾ കൂടുതൽ വ്യക്തമാണ്.
അപേക്ഷകൾ
ഗോതമ്പ്, ധാന്യം, അരി, പരുത്തി, സോയാബീൻ തുടങ്ങിയ പ്രധാന GMO വിളകളിൽ നിന്ന് ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ള ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കാനും ജിഎംഒ വിളകളിൽ ട്രാൻസ്ജെനിക് പിസിആർ കണ്ടെത്താനും കിറ്റിന് കഴിയും.
എല്ലാ ഉൽപ്പന്നങ്ങളും ODM/OEM- നായി ഇച്ഛാനുസൃതമാക്കാൻ കഴിയും. വിശദാംശങ്ങൾക്ക്,കസ്റ്റമൈസ്ഡ് സർവീസ് (ODM/OEM) ക്ലിക്ക് ചെയ്യുക
 |
ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ അരി, ചോളം, സോയാബീൻ, കോട്ടൺ, ഗോതമ്പ് എന്നിവയുടെ 100 മില്ലിഗ്രാം ഇലകളിൽ ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ നടത്തി. പരീക്ഷണം രണ്ടുതവണ ആവർത്തിച്ചു. മൊത്തം 100 μl എലുവന്റുകളിൽ നിന്നുള്ള 3 μl ഡിഎൻഎ ഓരോ വരിയിലും ലോഡ് ചെയ്തു. അഗറോസ് ജെലിന്റെ സാന്ദ്രത 2%ആയിരുന്നു. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് 6 V/cm- ൽ 20 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് നടത്തി. D15000: TIANGEN D15000 DNA മാർക്കർ. |
 |
പിസിആർ കണ്ടെത്തൽ അരി, ചോളം, സോയാബീൻ, കോട്ടൺ, ഗോതമ്പ് എന്നിവയുടെ ജനിതക ഡിഎൻഎ യഥാക്രമം വർദ്ധിപ്പിച്ചു. പരീക്ഷണം രണ്ടുതവണ ആവർത്തിച്ചു. മൊത്തം 20 μl പ്രതിപ്രവർത്തന സംവിധാനത്തിൽ നിന്ന് 6 μl ഓരോ വരിയിലും ലോഡ് ചെയ്തു. അഗറോസ് ജെലിന്റെ സാന്ദ്രത 2%ആയിരുന്നു. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് 6 V/cm- ൽ 20 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് നടത്തി. D15000: TIANGEN D15000 DNA മാർക്കർ. |
A-1 ടെംപ്ലേറ്റ്
ടെംപ്ലേറ്റിൽ പ്രോട്ടീൻ മാലിന്യങ്ങൾ അല്ലെങ്കിൽ ടാക് ഇൻഹിബിറ്ററുകൾ മുതലായവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു - ഡിഎൻഎ ടെംപ്ലേറ്റ് ശുദ്ധീകരിക്കുക, പ്രോട്ടീൻ മാലിന്യങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്യുക അല്ലെങ്കിൽ ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിഎൻഎ എക്സ്ട്രാക്റ്റ് ചെയ്യുക.
Temp ടെംപ്ലേറ്റ് ഡീനാറ്ററേഷൻ പൂർത്തിയായിട്ടില്ല —— ഉചിതമായി ഡിനാറ്ററേഷൻ താപനില വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ഡീനാറ്ററേഷൻ സമയം ദീർഘിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
Mp ടെംപ്ലേറ്റ് ഡീഗ്രഡേഷൻ —— ടെംപ്ലേറ്റ് വീണ്ടും തയ്യാറാക്കുക.
എ -2 പ്രൈമർ
Pri പ്രൈമറുകളുടെ മോശം നിലവാരം —— പ്രൈമർ വീണ്ടും സമന്വയിപ്പിക്കുക.
Mer പ്രൈമർ ഡീഗ്രഡേഷൻ —— സംരക്ഷണത്തിനായി ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയുള്ള പ്രൈമറുകൾ ചെറിയ അളവിലേക്ക് മാറ്റുക. ഒന്നിലധികം മരവിപ്പിക്കൽ, ഉരുകൽ അല്ലെങ്കിൽ ദീർഘകാല 4 ° C ക്രയോപ്രെസർവ്ഡ് എന്നിവ ഒഴിവാക്കുക.
Pri പ്രൈമറുകളുടെ തെറ്റായ ഡിസൈൻ (ഉദാ: പ്രൈമർ ദൈർഘ്യം പോരാ
A-3 Mg2+ഏകാഗ്രത
G എംജി2+ ഏകാഗ്രത വളരെ കുറവാണ് —— Mg കൃത്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുക2+ ഏകാഗ്രത: Mg ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക2+ ഒപ്റ്റിമൽ Mg നിർണ്ണയിക്കാൻ 0.5 mM ഇടവേളയിൽ 1 mM മുതൽ 3 mM വരെയുള്ള പ്രതികരണങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ ഏകാഗ്രത2+ ഓരോ ടെംപ്ലേറ്റിനും പ്രൈമറിനുമുള്ള ഏകാഗ്രത.
A-4 അനിയലിംഗ് താപനില
An ഉയർന്ന അനിയലിംഗ് താപനില പ്രൈമറിന്റെയും ടെംപ്ലേറ്റിന്റെയും ബൈൻഡിംഗിനെ ബാധിക്കുന്നു. —— അനിയലിംഗ് താപനില കുറയ്ക്കുകയും 2 ° C ഗ്രേഡിയന്റ് ഉപയോഗിച്ച് അവസ്ഥ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുകയും ചെയ്യുക.
A-5 വിപുലീകരണ സമയം
Extension ഹ്രസ്വ വിപുലീകരണ സമയം —— വിപുലീകരണ സമയം വർദ്ധിപ്പിക്കുക.
പ്രതിഭാസം: നെഗറ്റീവ് സാമ്പിളുകളും ടാർഗെറ്റ് സീക്വൻസ് ബാൻഡുകൾ കാണിക്കുന്നു.
പിസിആറിന്റെ എ -1 മലിനീകരണം
Target ടാർഗെറ്റ് സീക്വൻസ് അല്ലെങ്കിൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ക്രോസ് മലിനീകരണം —— നെഗറ്റീവ് സാമ്പിളിൽ ടാർഗെറ്റ് സീക്വൻസ് അടങ്ങിയ സാമ്പിൾ പൈപ്പ് ചെയ്യരുത് അല്ലെങ്കിൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിൽ നിന്ന് പുറത്തേക്ക് ഒഴിക്കരുത്. നിലവിലുള്ള ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ ഇല്ലാതാക്കാൻ റിയാക്ടറുകളോ ഉപകരണങ്ങളോ ഓട്ടോക്ലേവ് ചെയ്യണം, കൂടാതെ നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണ പരീക്ഷണങ്ങളിലൂടെ മലിനീകരണത്തിന്റെ അസ്തിത്വം നിർണ്ണയിക്കണം.
Ag റിയാജന്റ് മലിനീകരണം —— റിയാക്ടറുകളോട് ചേർന്ന് കുറഞ്ഞ താപനിലയിൽ സൂക്ഷിക്കുക.
എ -2 പ്രൈംr
G എംജി2+ ഏകാഗ്രത വളരെ കുറവാണ് —— Mg കൃത്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുക2+ ഏകാഗ്രത: Mg ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക2+ ഒപ്റ്റിമൽ Mg നിർണ്ണയിക്കാൻ 0.5 mM ഇടവേളയിൽ 1 mM മുതൽ 3 mM വരെയുള്ള പ്രതികരണങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ ഏകാഗ്രത2+ ഓരോ ടെംപ്ലേറ്റിനും പ്രൈമറിനുമുള്ള ഏകാഗ്രത.
Pri തെറ്റായ പ്രൈമർ ഡിസൈൻ, ടാർഗെറ്റ് സീക്വൻസിന് നോൺ-ടാർഗെറ്റ് സീക്വൻസുമായി ഹോമോളജി ഉണ്ട്. —— പ്രൈമറുകൾ വീണ്ടും രൂപകൽപ്പന ചെയ്യുക.
പ്രതിഭാസം: പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ബാൻഡുകൾ പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന വലുപ്പവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ല, വലുതോ ചെറുതോ അല്ലെങ്കിൽ ചിലപ്പോൾ നിർദ്ദിഷ്ട ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ബാൻഡുകളും നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ബാൻഡുകളും സംഭവിക്കുന്നു.
എ -1 പ്രൈമർ
Pri മോശം പ്രൈമർ പ്രത്യേകത
—— റീ-ഡിസൈൻ പ്രൈമർ.
Mer പ്രൈമർ കോൺസൺട്രേഷൻ വളരെ കൂടുതലാണ് —— ഡിനാറ്ററേഷൻ താപനില കൃത്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ഡിനാറ്ററേഷൻ സമയം ദീർഘിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
A-2 Mg2+ ഏകാഗ്രത
എംജി2+ ഏകാഗ്രത വളരെ കൂടുതലാണ് —— Mg2+ ഏകാഗ്രത ശരിയായി കുറയ്ക്കുക: Mg ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക2+ ഒപ്റ്റിമൽ Mg നിർണ്ണയിക്കാൻ 0.5 mM ഇടവേളയിൽ 1 mM മുതൽ 3 mM വരെയുള്ള പ്രതികരണങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ ഏകാഗ്രത2+ ഓരോ ടെംപ്ലേറ്റിനും പ്രൈമറിനുമുള്ള ഏകാഗ്രത.
എ -3 തെർമോസ്റ്റബിൾ പോളിമറേസ്
En അമിതമായ എൻസൈം തുക —— 0.5 U ഇടവേളകളിൽ ഉചിതമായ എൻസൈം തുക കുറയ്ക്കുക.
A-4 അനിയലിംഗ് താപനില
Ne അനിയലിംഗ് താപനില വളരെ കുറവാണ് —— അനുചിതമായ താപനില വർദ്ധിപ്പിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ രണ്ട്-ഘട്ട അനിയലിംഗ് രീതി സ്വീകരിക്കുക
A-5 PCR സൈക്കിളുകൾ
P വളരെയധികം PCR സൈക്കിളുകൾ —— PCR സൈക്കിളുകളുടെ എണ്ണം കുറയ്ക്കുക.
എ -1 പ്രൈമർ———————————————————————————————————————————————————————————————————— അല്ലെങ്കിൽ കൂടുകൂട്ടിയ PCR നടത്തുക.
എ -2 ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിഎൻഎ
ടെംപ്ലേറ്റ് ശുദ്ധമല്ല - ടെംപ്ലേറ്റ് ശുദ്ധീകരിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ ഡിഎൻഎയെ ശുദ്ധീകരണ കിറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ചെടുക്കുക.
A-3 Mg2+ ഏകാഗ്രത
——Mg2+ ഏകാഗ്രത വളരെ കൂടുതലാണ് —— Mg ശരിയായി കുറയ്ക്കുക2+ ഏകാഗ്രത: Mg ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക2+ ഒപ്റ്റിമൽ Mg നിർണ്ണയിക്കാൻ 0.5 mM ഇടവേളയിൽ 1 mM മുതൽ 3 mM വരെയുള്ള പ്രതികരണങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ ഏകാഗ്രത2+ ഓരോ ടെംപ്ലേറ്റിനും പ്രൈമറിനുമുള്ള ഏകാഗ്രത.
A-4 dNTP
——DNTP- യുടെ സാന്ദ്രത വളരെ കൂടുതലാണ് —— dNTP- യുടെ സാന്ദ്രത ഉചിതമായി കുറയ്ക്കുക
A-5 അനിയലിംഗ് താപനില
—— വളരെ കുറഞ്ഞ അളവിലുള്ള താപനില —— അനുബന്ധ താപനില ഉചിതമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുക
എ -6 സൈക്കിളുകൾ
—— വളരെയധികം സൈക്കിളുകൾ —— സൈക്കിൾ നമ്പർ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക
ഉചിതമായ പോളിമറേസ് തിരഞ്ഞെടുക്കുക എന്നതാണ് ആദ്യപടി. 3'-5 'എക്സോ ന്യൂക്ലീസ് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ അഭാവം മൂലം റെഗുലർ ടാക് പോളിമറേസിന് പ്രൂഫ് റീഡ് ചെയ്യാൻ കഴിയില്ല, കൂടാതെ പൊരുത്തക്കേട് ശകലങ്ങളുടെ വിപുലീകരണ കാര്യക്ഷമതയെ ഗണ്യമായി കുറയ്ക്കും. അതിനാൽ, സാധാരണ ടാക് പോളിമറേസിന് 5 കെബിയിൽ കൂടുതലുള്ള ടാർഗെറ്റ് ശകലങ്ങൾ ഫലപ്രദമായി വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയില്ല. വിപുലീകരണ കാര്യക്ഷമത മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിനും നീണ്ട ശകലങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും പ്രത്യേക പരിഷ്ക്കരണങ്ങളോ മറ്റ് ഉയർന്ന വിശ്വാസ്യതയുള്ള പോളിമറേസുകളോ ഉള്ള ടാക് പോളിമറേസ് തിരഞ്ഞെടുക്കണം. കൂടാതെ, നീളമുള്ള ശകലങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് പ്രൈമർ ഡിസൈൻ, ഡീനാറ്ററേഷൻ സമയം, എക്സ്റ്റൻഷൻ സമയം, ബഫർ പിഎച്ച്, മുതലായവ ക്രമീകരിക്കേണ്ടതുണ്ട്. ടെംപ്ലേറ്റ് കേടുപാടുകൾ തടയുന്നതിന്, 94 ° C ലെ ഡീനാറ്ററേഷൻ സമയം ഓരോ ചക്രത്തിലും 30 സെക്കന്റോ അതിൽ കുറവോ ആയി കുറയ്ക്കണം, ആംപ്ലിഫിക്കേഷന് മുമ്പ് താപനില 94 ° C ആയി ഉയർത്താനുള്ള സമയം 1 മിനിറ്റിൽ കുറവായിരിക്കണം. കൂടാതെ, വിപുലീകരണ താപനില ഏകദേശം 68 ° C ആയി ക്രമീകരിക്കുകയും 1 kb/min എന്ന നിരക്കനുസരിച്ച് വിപുലീകരണ സമയം രൂപകൽപ്പന ചെയ്യുകയും ചെയ്താൽ നീണ്ട ശകലങ്ങളുടെ ഫലപ്രദമായ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉറപ്പാക്കാനാകും.
ഉയർന്ന വിശ്വാസ്യതയുള്ള വിവിധ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസുകൾ ഉപയോഗിച്ച് പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷന്റെ പിശക് നിരക്ക് കുറയ്ക്കാൻ കഴിയും. ഇതുവരെ കണ്ടെത്തിയിട്ടുള്ള എല്ലാ Taq DNA പോളിമറേസുകളിലും Pfu എൻസൈമിന് ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ പിശക് നിരക്കും ഏറ്റവും ഉയർന്ന വിശ്വസ്തതയും ഉണ്ട് (അറ്റാച്ചുചെയ്ത പട്ടിക കാണുക). എൻസൈം തിരഞ്ഞെടുപ്പിന് പുറമേ, ബഫർ കോമ്പോസിഷൻ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക, തെർമോസ്റ്റബിൾ പോളിമറേസ് ഏകാഗ്രത, പിസിആർ സൈക്കിൾ നമ്പർ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുക എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള പ്രതികരണ സാഹചര്യങ്ങൾ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യുന്നതിലൂടെ ഗവേഷകർക്ക് പിസിആർ മ്യൂട്ടേഷൻ നിരക്ക് കുറയ്ക്കാനാകും.
ഉൽപ്പന്ന വിഭാഗങ്ങൾ
എന്തുകൊണ്ടാണ് ഞങ്ങളെ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നത്
സ്ഥാപിതമായതുമുതൽ, ഞങ്ങളുടെ ഫാക്ടറി തത്ത്വം പാലിച്ച് ഒന്നാം ലോകോത്തര ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ വികസിപ്പിച്ചുകൊണ്ടിരിക്കുകയാണ്
ആദ്യം ഗുണമേന്മയുള്ള. ഞങ്ങളുടെ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ വ്യവസായത്തിൽ മികച്ച പ്രശസ്തിയും പുതിയതും പഴയതുമായ ഉപഭോക്താക്കൾക്കിടയിൽ മൂല്യനിർണ്ണയം നേടിയിട്ടുണ്ട്.
- ഫോൺ: +86 010-59822688
- കെട്ടിടം 5, നമ്പർ 86, ഷുവാങ്‌യിംഗ് വെസ്റ്റ് റോഡ്, ചാങ്പിംഗ് ജില്ല, ബീജിംഗ്.
- people@tiangen.com
